離子交換色譜法是通過試樣離子在離子交換劑(固相)和淋洗液(液相)之間的分配系數(shù)不同,從而使欲測(cè)組分與干擾組分達(dá)到分離的一種固-液分離法。該色譜法實(shí)際是離子交換原理和液相柱色譜技術(shù)的有機(jī)結(jié)合,現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于無機(jī)離子或有機(jī)離子混合物的分離,因此應(yīng)用范圍廣泛。
離子交換色譜的優(yōu)點(diǎn)是:
⑴具有開放性支持骨架,大分子可以自由進(jìn)入和迅速擴(kuò)散,故吸附容量大。
⑵具有親水性,對(duì)大分子的吸附不大牢固,用溫和條件使可以洗脫,不致引起蛋白質(zhì)變性或酶的失活。
⑶多孔性,表面積大、交換容量大,回收率高,可用于分離和制備。
離子交換色譜柱常見問題分析:
1、離子色譜柱柱壓升高可能的原因有:
(1)離子色譜柱過濾網(wǎng)板被玷污,需要更換。
(2)柱接頭擰得過緊,使輸液管端口變形。
(3)PEEK 材料的管子切口不齊。
2、分離度降低可能的原因有: 系統(tǒng)有泄漏時(shí)分離度會(huì)降低;分離柱被玷污后柱容量因子 k’值變小;淋洗液類型和濃度 不合適等。
3、死體積增大 分離柱入口樹脂損失造成死體積增大或樹脂床進(jìn)入空氣使樹脂床產(chǎn)生溝流會(huì)使分離度 下降。若分離柱入口處出現(xiàn)空隙,可填充一些惰性樹脂球以減小死體積的影響。
4、保留時(shí)間縮短或延長色譜峰保留時(shí)間的改變會(huì)影響待測(cè)組分的定性和容量,因?yàn)樵谏V分析中穩(wěn)定的保留時(shí)間對(duì)獲得準(zhǔn)確、可靠的結(jié)果是十分重要的。